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简述利用91橙子视频法测定毒鼠强的原理并简述此方法检测固体样品的过程? ● 91橙子视频法检测原理：毒鼠强可与二羟基萘二磺酸发生反应变为淡紫色，本方法检出限为1ug，低检出浓度为2ug/ml，浓度高时可变为深红色。 ● 检测固体样品过程：取2mL或2g样品放入比色管中，加入5mL乙酸乙酯，充分振摇，静置，取上清液2mL于试管中或表面皿上，在 85℃左右水浴中加热,待乙酸乙酯剩余1mL以下时,提高水浴温度挥干余液，放至室温后，加入1mL的纯净水充分溶解残渣，加入3滴毒鼠强显色剂，轻轻摇匀，加入 5mL毒鼠强试液，轻轻摇动后，将试管放入90℃以上水浴中，加热5min后取出，观察颜色变化。溶液颜色变为淡紫红色为毒鼠强阳性反应，随着毒鼠强浓度增加，紫色加深。

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蛋白激酶GELISA91橙子视频91橙子视频（多种属）行业操作流程如下： （1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。　 （2）酶标板置4℃，包被过夜。 （3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 （4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF工作液50μl。　 （5）酶标板置37℃箱的湿盒内，孵育60min。　 （6）洗板，同（4）。　 （7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔工作液 100μl。　 （8）酶标板置37℃箱的湿盒内，孵育60min。　 （9）洗板，同（4）。　 （10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。　 （11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。　 （12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以由容器上的划痕或指印等造成的光。 （13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定。

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编辑：小檀20180918