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●外源性物质 ●: 外源性物质经常是由于用于ELISA测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被污染、标本贮存过久、标本凝集 不全和采血管中添加物等影响。 （1）标本溶血 由于各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为标记的 ELISA测定中，会导致非特异性显色，干扰测定结果。为克服上述干扰作用，标本采集时必须注重避免溶血。 （2）标本受细菌污染 因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶，因此，被细菌污染的标本同溶血标本一样，亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。 （3）标本保存不当 在冰箱中保存过久的标本，血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体，在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成 假阳性；标本放置时间过长（如**以上），有时抗原或抗体免疫活性减弱，亦可出现假阴性。为克服上述干扰，ELISA测定的血清 标本宜为新鲜采集；如不能立即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混合后再测定，但混匀时应轻柔，不可强烈振荡。 （4）标本凝集不全 在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下，正常血液采集后1/2~2h开始凝固，18~24h完全凝固。**检验工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成 肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；这类情况于次日复查时因血凝已完全，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查结果变为阴性 。为避免上述干扰作用，解决的办法好是血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。 （5）标本管中添加物质的影响 抗凝剂（如肝素，EDTA）、酶抑制剂（如NaN3可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性）及快速分离血清的分离胶等均对ELISA测定有一定干扰作用。 综上所述，对**检验ELISA测定中出现的假阳性或假阴性结果，在考虑橙子视频旧款因素和操作因素之外，更多的应从标本因素方面进行分 析，并应采取相应措施排除干扰作用，从而为**提供正确可靠的检测结果。 公司的服务挺好，挺专业的，周期不延期。满意

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酶联免疫吸附实验（ELISA）已经成为实验室常用的检测蛋白含量变化的实验技术，常用的检测方法是用抗原包被孔板，然后用一抗和二抗检测抗原的变化。这里使用两种抗体的原因一方面是信号放大的需要，另一方面是要减少成本。假如每种抗体都用酶或者荧光素标记的话，那将会需要多少种标记的抗体呢？而且可以肯定价格一定不菲。而用标记二抗的方法就可以大大减少需要标记抗体的数目，同时也能提高标记抗体的效用，这样就能用尽量少的标记抗体满足尽量多的实验要求。

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编辑：小檀20180914